Транскрипт

1 Краткая инструкция BIOHIT ЭКСПРЕСС-ТЕСТ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ HELICOBACTER PYLORI ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ Набор для проведения экспресс-теста на Helicobacterpylori основан на биохимической реакции для качественного определения уреазной активности H. pylori непосредственно в биоптатах в условиях обследования по месту лечения (например, в эндоскопическом кабинете) ВНИМАНИЕ! Если в течение 2 4 недель до исследования пациент принимал антибиотики, ингибиторы протонной помпы или Н2-блокаторы могут наблюдаться ложноотрицательные результаты по причине низкой бактериальной нагрузки Н.pylori. Бактериальная нагрузка так же может быть снижена при язвенном кровотечении, предраковых состояниях (атрофических изменениях СОЖ) и злокачественных заболеваниях. ПРАВИЛА ОТБОРА ОБРАЗЦА ДЛЯ ТЕСТИРОВАНИЯ Биоптаты рекомендуется забирать по 5 мм щипцами; Для обеспечения высокой чувствительности исследования рекомендуется проводить экспресс-тест на Helicobacterpylori с биоптатами как из преддверия, так и из тела желудка. Оба биоптата можно поместить в одну лунку с гелем; Планшеты до тестирования должны принять комнатную температуру (20-25 C) и выдержите не менее 15 минут перед началом использования; С биоптатов необходимо удалить кровь, поместив их на короткое время на стерильную марлевую салфетку; ОБЯЗАТЕЛЬНО ознакомьтесь с подробной инструкции перед тестированием. ТЕСТИРОВАНИЕ


2 ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТА ТЕСТИРОВАНИЯ Подробная инструкция BIOHIT ЭКСПРЕСС-ТЕСТ НЕПЕРЕНОСИМОСТЬ ЛАКТОЗЫ 1. ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ Набор для проведения экспресс-теста на Helicobacterpylori основан на биохимической реакции для качественного определения уреазной активности H. pylori непосредственно в биоптатах в условиях обследования по месту лечения (например, в эндоскопическом кабинете) и в лабораториях. 2. КЛИНИЧЕСКИЕ ДАННЫЕ Инфекция Helicobacterpylori важнейшая причина хронического гастрита. Другим возможным механизмом развития гастрита, в том числе тяжелого атрофического гастрита, является аутоиммунный механизм, который, в свою очередь, также может запускаться инфекцией, вызываемой H. pylori (1, 2). Этот экспресс-тест предназначен для диагностики инфекции, вызываемой H. pylori. Helicobacterpylori представляет собой спиралевидную грамотрицательную бактерию, которая колонизирует слизистую желудка человека. Этот микроорганизм обнаруживается в слое слизи желудка, покрывающем эпителиальные клетки желудка. Слизистая оболочка, колонизированная H. pylori, всегда воспаляется; это состояние называется хроническим поверхностным, или неатрофическим, гастритом, который в отсутствие лечения персистирует в


3 течение всей жизни (1). Хронический воспалительный процесс может приводить к развитию атрофического гастрита и связанных с ним состояний: пептической язвы и рака желудка двум наиболее значимым заболеваниям верхнего отдела желудочно-кишечного тракта (3 6). Эпидемиологические доказательства связи между инфекцией, вызываемой H. pylori, и аденокарциномой или лимфомой из слизисто-ассоциированной лимфоидной ткани (MALTлимфомой) желудка позволяют классифицировать микроорганизм как канцероген группы I (7 9). 3. ПРИНЦИП ЭКСПРЕСС-ТЕСТА Экспресс-тест, разработанный компанией Biohit для диагностики инфекции в желудке, вызываемой Helicobacterpylori, основан на определении активности фермента уреазы в биоптате. Биоптат слизистой оболочки желудка подвергается исследованию сразу после забора. Цветовая реакция, развивающаяся в геле, указывает на наличие уреазной активности в биоптате. При массивной колонизации H. pylori (высокая плотность колонизации) время реакции составляет 2 минуты; в случае низкой плотности колонизации H. pylori реакция может длиться до 30 минут. Анализ основан на следующей химической реакции: (NH2 ) 2 CO + 2H2 O + H+ —>2NH4 + + HCO3 — H. pylori продуцирует уреазу, которая разрушает мочевину до иона аммония (NH4 +). Образование иона аммония регистрируется изменением цвета индикатора, присутствующего в геле.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Для диагностики invitro. ВНИМАНИЕ: Обращайтесь с биоптатами как с потенциально биологически опасным материалом. Все образцы должны считаться потенциально инфицированными, поэтому с ними следует обращаться соответствующим образом. По этим вопросам обращайтесь к публикациям Министерства здравоохранения и социального обеспечения США (Бетесда, Мэриленд, США) о процедурах обеспечения лабораторной безопасности при различных заболеваниях в издании «Биологическая безопасность в микробиологических и биомедицинских лабораториях», 1999, издание 4 (CDC/NIH) и (CDC) , или любым другим аналогичным местным или национальным правилам. При работе с образцами всегда используйте защитные перчатки. Перед выполнением экспресс-теста ознакомьтесь со всеми инструкциями. Не используйте тестовые планшеты после окончания срока годности. Утилизируйте использованные тестовые планшеты как биологически опасный материал в соответствии с местными и национальными правилами. 1. ЗАБОР ОБРАЗЦОВ. ПРАВИЛА ОБРАЩЕНИЯ С ОБРАЗЦАМИ На каждый тестовый планшет следует нанести только один образец. Рекомендуется произвести забор образца при помощи щипцов 5 мм с большой кривизны средней части преддверия или тела желудка. Для обеспечения высокой чувствительности исследования рекомендуется проводить экспресс-тест на Helicobacterpylori с биоптатами как из преддверия, так и из тела желудка. (В некоторых случаях колонизация желудка H. pylori может быть ограничена только преддверием или телом желудка).
одном планшете можно одновременно исследовать несколько биоптатов, взятых у одного пациента, если они помещаются в геле. При проведении гастроскопии биоптаты для экспресс-теста на Helicobacterpylori следует забирать как можно скорее после начала исследования для предотвращения возможных ошибок вследствие заброса нейтрального или щелочного содержимого двенадцатиперстной кишки. Перед проведением теста из биоптатов необходимо удалить кровь, поместив их на короткое время на стерильную марлевую салфетку. Это связано с тем, что большое количество крови ( 3, эритроцитов/л) может помешать проведению исследования.

4 6. СОСТАВ НАБОРА И ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТА Каждый набор Biohit для проведения экспресстеста на Helicobacterpylori содержит количество реагента, рассчитанное на 50 исследования. До использования храните реагенты в охлажденном виде (2 8 С) Тестовые планшеты Состав: Два пакета по 25 тестовых планшетов в каждом. На каждом планшете находится лунка с гелем, содержащим желтый индикатор, в которую следует помещать биоптат. Приготовление: Готовы к использованию. Стабильность: Стабильны до окончания срока годности Инструкция по использованию 7. НЕОБХОДИМЫЕ МАТЕРИАЛЫ, НЕ ВХОДЯЩИЕ В КОМПЛЕКТ ПОСТАВКИ Щипцы Секундомер Стерильные марлевые салфетки Перчатки 8. ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ Храните экспресс-тест на H. pylori в охлажденном виде (2 8 С). В случае хранения при этой температуре набор стабилен до истечения срока годности, указанного на этикетке коробки набора и на этикетках пакетов с тестовыми планшетами.
замораживайте и не подвергайте набор действию высокой температуры; не храните при температуре выше 8 С. Не используйте тестовые планшеты после истечения срока годности, указанного на этикетке. 9. ПРОЦЕДУРА ТЕСТА Перед началом работы полностью ознакомьтесь с процедурой проведения исследования. ШАГ 1: Уреазная реакция 1. Перед использованием выдержите тестовый планшет при комнатной температуре как минимум в течение 30 минут. 2. Удалите этикетку, закрывающую лунку на планшете. Убедитесь, что цвет реагента желтый. Поместите биоптат в лунку с гелем так, чтобы он был полностью окружен гелем. См. рисунок Инкубируйте при комнатной температуре (20 25 С) в течение 1 2 минут. ШАГ 2: После инкубации в течение 1 2 минут оцените изменение цвета по сравнению с цветовой картой на этикетке. Если реагент изменяет цвет с желтого на интенсивно красный, то результат теста считается положительным. Любое КРАСНОЕ окрашивание в геле (за исключением крови) указывает на ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ результат при колонизации низкой плотности не обязательно весь гель становится КРАСНЫМ. Если цвет не изменится через 2 минуты, продолжайте инкубацию максимум до 30 минут. Если через 30 минут полной инкубации цвет геля не становится интенсивно красным, то результат теста считается отрицательным. См. рисунок 2. Если гель приобретает (или теряет) цвет после 30 минут инкубации, то это не имеет никакого диагностического значения.
стовый планшет следует утилизировать через 30 минут. 10. РЕЗУЛЬТАТЫ Результаты теста следует интерпретировать следующим образом: Гель с реагентом: Желтый ОТРИЦАТЕЛЬНЫЙ (инфекции, вызываемой Helicobacterpylori, нет) Гель с реагентом: Интенсивно красный ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ (инфекция, вызываемая Helicobacterpylori, есть) 11. ОГРАНИЧЕНИЯ Ложноотрицательные результаты могут наблюдаться, если в течение 2 4 недель до исследования пациент принимал антихеликобактерные антибиотики. могут наблюдаться, если перед проведением исследования пациент принимал антациды (ингибиторы протонной помпы или Н2-блокаторы). Как и при любой диагностической процедуре, результаты экспресс-теста на

5 Helicobacterpylori компании Biohit должны интерпретироваться с учетом клинической картины пациента и любой другой информации, имеющейся у врача. 12. ГАРАНТИЯ Biohit исправит все дефекты, обнаруженные в любом продукте («Дефектный продукт»), причинами которых являются использо- вание ненадлежащих материалов или нарушение технологии производства, и которые препятствуют механическому функцио- нированию или применению по назначению продуктов, включая, но не ограничиваясь, функции, указанные в спецификациях продуктов Biohit. ВМЕСТЕ С ТЕМ ЛЮБАЯ ГАРАНТИЯ БУДЕТ СЧИТАТЬСЯ АННУЛИРОВАННОЙ, ЕСЛИ ОБНАРУЖИТСЯ, ЧТО ОТКАЗ ВЫЗВАН НЕПРАВИЛЬНЫМ ОБРАЩЕНИЕМ, ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ НЕ ПО НАЗНАЧЕНИЮ, СЛУЧАЙНЫМ ПОВРЕЖДЕНИЕМ, НЕПРАВИЛЬ- НЫМ ХРАНЕНИЕМ ИЛИ ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПРОДУКТОВ НЕ В СООТВЕТСТВИИ С ОГРАНИЧЕНИЯМИ ИЛИ НЕ В СООТВЕТСТВИИ С ИХ СПЕЦИФИКАЦИЯМИ, В НАРУШЕНИЕ ИНСТРУКЦИЙ, ПРИВЕДЕННЫХ В РУКОВОДСТВЕ ПО ЭКСПЛУАТАЦИИ.
ок настоящей гарантии указан в руководстве по эксплуатации продуктов и действует с даты поставки соответствующего продукта компанией Biohit. Этот набор BiohitDiagnostic произведен в соответствии с протоколами управления качеством по ISO 9001 / ISO В случае споров об интерпретации следует принимать во внимание тест инструкции на английском языке. REFERENCES/LÄHTEET/REFERENSER/LITERATURVERWEISE/RÉFÉRENCES/REFERENCIAS/ REFERÊNCIAS/ BIBLIOGRAFIA/СПИСОКЛИТЕРАТУРЫ 1. Varis K, Sipponen P. Gastritis. In: Principles and Practice of Gastroenterology and Hepatology. Gitnick G (ed.). Appleton & Lange, Connecticut, 1994; Sipponen P. Helicobacter pylori gastritis-epidemiology. J Gastroenterol 1997; 32: Sipponen P, Marshall BJ. Gastritis and gastric cancer. Western countries. GastroenterolClin North Am 2000; 29: Wadström T. An update on Helicobacter pylori Current Opinion in Gastroenterology 1995; 11: Northfield TC, Mendall M, Goggin PC. Helicobacter pylori Infection, Pathophysiology, Epidemiology and Management. Kluwer Academic Press; Dortrecth: Sipponen P. Update on the Pathologic Approach to the Diagnosis of Gastritis, Gastric Atrophy, and Helicobacter pylori and its sequalae. J ClinGastroenterol 2001; 32: Parsonnet J, Friedman GD, Vandersteen DP, Chang Y, Vogelman JH, Orentreich N, Sibley RK. Helicobacter pylori infection and the risk of gastric carcinoma.
Engl J Med 1991; 325: Parsonnet J, Hansen S, Rodriguez L, Gelb AB,Warnke RA, Jellum E, Orentreich N, Vogelman JH, Friedman GD. Helicobacter pylori infection and gastric lymphoma. N Engl J Med 1994; 330: IARC Working Group on the evaluation of carcinogenic risks to humans. Helicobacter pylori. Schistomes, liver flukes, and Helicobacter pylori: views and expert opinions of an IARC Working group on the Evaluation of Carcinogenic Risks to Humans. Lyon: IARC, 1994: SYMBOLS/SYMBOLIT/SYMBOLER/SYMBOLE/SYMBOLES/SÍMBOLOS/SIMBOLOS/SIMBOLI/ СИМВОЛОВ +2 8 C Figure 1 Figure 2 NEGATIVE POSITIVE POSITIVE PERFORMANCE CHARACTERISTICS The gold standard H. pylori culture test was compared to the Biohit Helicobacter pylori quick test results and histological H. pylori detections in biopsy specimens. The culture test, considered as the gold standard, identified 57 H. pylori negative biopsies and 63 H. pylori positive biopsies. Results are shown in the table below including the specificities and sensitivities. Culture The Biohit Helicobacter pylori quick test Histology Negative Positive Negative Positive 57 Negative Positive Specificity 87.7 % 86.0 % Sensitivity 93.7 % 90.5 % DATE OF ISSUE/ JULKAISUPÄIVÄ/ UTGIVNINGSDATUM/ VERÖFFENTLICHUNGSDATUM/ DATE DE PUBLICATION/ FECHA DE PUBLICACIÓN/ DATA DE PUBLICAÇÃO/ DATA DI PUBBLICAZIONE/ ДАТАВЫПУСКА HELICOBACTER PYLORI quick test Version 11,

docplayer.ru

Методы диагностики

Metody-diagnostiki-Helicobacter-pylori

Анализ крови на антитела к Helicobacter pylori

Преимущества


  • доступен всем пациентам;
  • не сопровождается выраженным дискомфортом и стрессом при проведении процедуры (инъекционный метод забора крови);
  • прием лекарственных препаратов, применяемых для лечения заболеваний желудка и двенадцатиперстной кишки, не оказывает влияние на результат исследования.

Подготовка

Процедура забора крови проводится утром натощак.

  • За сутки до исследования из рациона исключается жирная пища.
  • Курение прекращают за 8 часов до анализа.

Проведение процедуры

VenepunkcijaЗабор крови производится путем венепункции. Материал отбирают в стерильную вакуумную пробирку с активатором свертывания для быстрого отделения сыворотки. Кровь доставляется в лабораторию в течение 2 часов. Микропробирки с сывороткой разрешается хранить в холодильнике при температуре 2-8 °С или в морозильной камере при -20 °С до 10 суток.

Особенности метода

Для выявления бактерий применяется иммуноферментный анализ – ИФА.
о лабораторный метод предполагает исследование сыворотки крови. Путем химических реакций врачи определяют наличие в ней антител – специфических белков иммунологической природы, выделяющихся при воздействии на организм человека различных антигенов, не знакомых ему (чужеродных бактерий, вирусов, грибов, токсинов, аллергенов и т. д.). Helicobacter pylori является инфекционным возбудителем гастропатологии. При попадании в желудочно-кишечный тракт он активирует систему иммунитета и вызывает выработку антител – иммуноглобулинов (Ig). ИФА помогает диагностировать наличие или отсутствие данной инфекции.

Бывают ситуации, когда обнаруженные антитела в сыворотке крови является ложноположительным результатом. Это может быть связано с длительным циркулированием в плазме иммуноглобулинов после уничтожения бактерий вследствие эрадикационной терапии. Антитела присутствуют в крови в течение месяца после лечения, а у некоторых остаются пожизненно. В другом случае все наоборот. Инфицирование есть, а антитела в сыворотке крови не определяются (ложноотрицательный результат). Это может быть связано с ранним периодом после заражения. Антитела не успевают выработаться из-за слабого иммунного ответа. Чтобы избежать неточностей в результатах, необходимо дополнительно исследовать фракции иммуноглобулинов 3 видов: M, G, A.

Характеристики специфических белков крови:

  • IFA-diagnostikaIgM – определяется сразу после заражения, до выявления IgG.
  • IgG – вырабатывается через 3-4 недели после попадания в организм инфекционного «агента». Концентрация данного класса иммуноглобулинов напрямую зависит от начала эрадикационной терапии. Ложноположительный результат на антитела к Helicobacter pylori сохраняется в течение месяца после полного уничтожения возбудителя.
  • IgA – секреторный иммуноглобулин. Может определяться в крови, слюне и желудочном соке. Свидетельствует о степени выраженности воспалительного процесса. Появляется в крови через 2-3 недели от момента заражения, может циркулировать в течение нескольких лет.

Расшифровка анализа

Существует качественное и количественное определение антител к Helicobacter pylori. В первом случае диагностируют наличие специфических иммуноглобулинов, а во втором их концентрацию. При качественном анализе определяются суммарные антитела (IgM, IgG, IgA). При количественном исследовании используют нормы содержания специфических белков в крови.

У каждой лаборатории свои референсные значения, применяемые для определенного вида реактивов.

Вид исследования Норма Патология
Качественный анализ на антитела к Helicobacter pylori Отрицательный (отсутствие антител) Положительный (наличие антител)
Количественный анализ на антитела к Helicobacter pylori: Нормальные референсные значения Превышение показателей
  • IgM
Отрицательный (значения IgM в пределах нормы)

При нормальных показателях IgG и IgA инфицирования нет

Положительный (референсные значения превышают норму)

Определяется сразу после заражения хеликобактериозом (выявляется в течение 3-4 недель от контакта с возбудителем)

  • IgG
Отрицательный

IgG может быть ложноотрицательным в течение 3-4 недель после заражения (IgM положительный)

Положительный

Инфицирование Helicobacter pylori

Может превышать норму в течение месяца после эрадикационной терапии

  • IgA
Отрицательный

Может быть ложноотрицательным в ранний период после контакта с возбудителем (в течение 2-3 недель от момента заражения)

Положительный

Чем выше концентрация IgA в сыворотке крови, тем активнее протекает воспалительный процесс

Возможны сомнительные результаты исследования. В таких случаях анализ на антитела к Helicobacter pylori повторяют через 2-3 недели.

Дыхательный уреазный тест на Helicobacter pylori

Dyhatelnyj-ureaznyj-test-na-Helicobacter-pylori

Преимущества

  • помогает выявить даже низкие концентрации возбудителя;
  • безопасный метод, не сопровождается радиоактивной нагрузкой на пациента (при использовании тестовых растворов мочевины, меченой нерадиоактивными изотопами);
  • оценивается процент бактерий на всей поверхности слизистой желудка;
  • удобен для пациентов (неинвазивный метод);
  • дыхательный уреазный тест с раствором карбамида разрешен беременным и младенцам;
  • является точным диагностическим исследованием.

Подготовка

  1. Дыхательный уреазный тест проводится натощак. Перед исследованием с утра можно почистить зубы без применения ополаскивателей и освежителей для полости рта. Не рекомендуется использовать жевательные резинки.
  2. Накануне забора проб разрешен легкий ужин. С 22 часов вечера и до начала процедуры есть нельзя, питье отменяют за час до исследования.Zapreshhennye-pered-sdachej-analiza-produkty
  3. За 2-3 дня до аэротеста запрещен прием алкоголя (пары алкоголя искажают результаты проб). Также на этот период исключаются продукты, вызывающие метеоризм (капуста, бобовые, чеснок, яблоки, грибы, черный хлеб и другие).
  4. Курение прекращают за 8 часов до начала процедуры.
  5. За 2 недели до исследования отменяют препараты висмута («Де-нол», «Викалин», «Викаир»), ингибиторы протонной помпы («Омез», «Нольпаза», «Нексиум» и другие). Данные средства угнетают активность уреазы.
  6. За неделю до проведения теста прекращают прием нестероидных противовоспалительных и антибактериальных препаратов.
  7. За 2 дня до процедуры исключаются лекарственные средства из группы блокаторов Н2 – гистаминовых рецепторов («Гистодил», «Примамет», «Ранитидин», «Фамотидин» и другие).
  8. Разрешены препараты, снижающие избыточную продукцию соляной кислоты желудком (антациды – «Алмагель», «Фосфалюгель», «Маалокс», «Гевискон» и т. д.).

Специфичность метода

Дыхательный уреазный тест на Helicobacter pylori связан с особенностями жизнедеятельности бактерии. Возбудитель в процессе своего существования выделяет защитный фермент – уреазу. Это биологически активное соединение помогает микроорганизму справляться с агрессивным воздействием соляной кислоты, выделяемой в составе желудочного сока. В процессе пищеварения уреаза расщепляет продукт метаболизма белков – мочевину. В результате образуется аммиак и углекислота. Эта химическая реакция стала основой для аэротеста. При дыхании пациента можно измерить концентрацию углекислого газа в выдыхаемом воздухе.

Разновидности дыхательного уреазного теста на Helicobacter pylori:

  • Аэротест с применением тестового раствора или драже мочевины, меченой радиоактивным углеродом (14С). Данный метод применяется редко из-за лучевой нагрузки на организм человека.

Проведение процедуры:

Dyhatelnyj-testПациент дышит через специальную трубку, находящуюся глубоко в ротовой полости. Дыхание должно быть ровным и спокойным. Трубка подсоединяется к специальному газовому спектрометру, замеряющему процент меченого углекислого газа в выдыхаемом воздухе. В начале процедуры берут 2 фоновые пробы аэротеста. Затем пациенту дают выпить тестовый раствор или проглотить специальное драже с мочевиной, меченой радиоактивным изотопом. Через каждые 15 минут (в течение часа) осуществляют забор дополнительных 4 проб выдыхаемого воздуха. Не допустимо попадание слюны в трубку, результат исследования может стать недостоверным. В этом случае пробу придется повторить через 40-60 минут после предыдущей. Чтобы избежать неприятной ситуации, трубку во время процедуры необходимо периодически вынимать, а слюну сглатывать.

  • Дыхательный уреазный тест с применением стабильного раствора мочевины, меченой нерадиоактивным углеродом (13С). Данный метод является «золотым стандартом» в диагностике хеликобактериоза (подробнее о методе см. здесь).

Проведение процедуры:

Во время исследования осуществляют забор 2 проб выдыхаемого воздуха. Процедура проводится на голодный желудок, в положении сидя. Пациент делает глубокий вдох и на несколько секунд задерживает дыхание. Затем выдыхает в герметичный одноразовый пакет, который сразу же плотно закрывают. Пациенту дают выпить тестовый раствор мочевины, меченой нерадиоактивным изотопом. Через полчаса осуществляют повторный забор выдыхаемого воздуха. С помощью масс-спектрометра измеряют концентрацию углекислоты в выдыхаемом воздухе. Полученные результаты сравнивают и делают выводы о наличии инфицирования.

  • Аэротест с применением раствора мочевины (карбамида). Данная методика не является максимально точной. Рекомендуется для диагностики хеликобактериоза у беременных женщин и маленьких детей.

Проведение процедуры:

Методика схожа с предыдущим тестом. У пациента делают забор 2 проб выдыхаемого воздуха. Измеряют концентрацию углекислого газа до и после применения тестового раствора карбамида.

Расшифровка результатов аэротеста на Helicobacter pylori

Вид исследования Норма Патология
Качественное определение уреазной активности Helicobacter pylori Отрицательный аэротест

 

Инфицирования нет или полное излечение после эрадикационной терапии

Положительный аэротест

 

Инфицирование Helicobacter pylori

Количественное определение уреазной активности Helicobacter pylori (по процентному содержанию изотопа в выдыхаемом воздухе) Менее 1%

 

Хеликобактериоза нет

  • 1-3,4% – легкое инфицирование Helicobacter pylori
  • 3,5-6,4% – среднетяжелый воспалительный процесс
  • 6,5-9,4% – тяжелое инфицирование
  • Более 9,5% – крайне тяжелая степень хеликобактериоза

Уреазный экспресс-тест на Helicobacter pylori

Jekspress-test-na-helikobakter-piloriВо время проведения гастроскопии (ФГДС) врач-эндоскопист берет кусочек слизистой из любого отдела желудка. Биоптат помещают на реагентную тест-полоску, обработанную раствором мочевины. Под действием фермента уреазы, выделяемой бактериями Helicobacter pylori, происходит ощелачивание среды. Мочевина расщепляется. Вследствие этого индикаторная полоска меняет свою окраску – с желтой на малиновую. Тест считается положительным. От скорости изменения цвета реагента зависит выраженность воспалительного процесса и концентрация возбудителя в биоптате.

Оценка полученного результата:

  • Helicobacter pylori (+) – слабое инфицирование (реагентная тест-полоска изменила свой цвет в течение суток).
  • Helicobacter pylori (++) – умеренный инфекционный процесс (реагентная тест-полоска изменила свой цвет в течение 2-3 часов).
  • Helicobacter pylori (+++) – тяжелое инфицирование (реагентная тест-полоска изменила свой цвет в течение одного часа).

Биопсия с исследованием материала

Преимущества

  • наиболее точный метод диагностики Helicobacter pylori (специфичность до 100%);
  • исключает возможность ложноположительных результатов, подтверждает наличие инфекции.

Подготовка

  1. Dieta-pri-jazveПроцедура ФГДС предусматривает 3-х дневную диету с исключением продуктов, раздражающих пищеварительный тракт (нельзя жареные, копченые, соленые, жирные и острые блюда).
  2. Запрещаются газированные напитки, кофе, алкоголь.
  3. Диета бесшлаковая на основе легкоусвояемого меню (каши на воде, отварное мясо, йогурты, овощные салаты и т. д.). Последний прием пищи за 12 часов до проведения ФГДС.
  4. За 3 часа до начала исследования необходимо отказаться от сигарет.
  5. Нельзя принимать лекарства перед эндоскопической процедурой.
  6. Прием жидкости прекращают за 1-2 часа до начала исследования.
  7. Не разрешается перед процедурой чистить зубы, применять ополаскиватели или освежители для полости рта, а также жевательные резинки.
  8. Гастроскопия проводится на голодный желудок.

Проведение процедуры

ФГДС сопровождается введением специального зонда в желудок. Процедура неприятна из-за диспепсических проявлений. Во время проглатывания зонда происходит раздражение рецепторов ротоглотки, и пациент испытывает чувство тошноты и рвотные позывы. Длительность процедуры обычно не превышает 10-15 минут. За это время специалист осматривает слизистую желудка и двенадцатиперстной кишки, выявляет очаги воспаления (эрозии, язвы, дефекты и т. д.) и проводит забор материала для последующего морфологического исследования.

BakposevДля бактериологического посева биоптата на питательную среду потребуется не менее 5 образцов тканей. Их помещают в стерильные пробирки с транспортным раствором. Затем доставляют в бактериологическую лабораторию. Helicobacter pylori выращивают на питательных средах в течение 3-6 дней, иногда дольше (до 12 суток).

Гистологическое исследование мазков-отпечатков, полученных из биоптатов слизистой желудка, является «золотым стандартом» среди инвазивных методов диагностики хеликобактериоза. Участки тканей при ФГДС берут с неповрежденного эпителия (исключают эрозивно-язвенные дефекты). Helicobacter pylori живет на здоровой слизистой желудка и двенадцатиперстной кишки. Затем полученные мазки-отпечатки окрашивают (по Романовскому-Гимзе, по Граму или другими красителями). Производят микроскопию. Бактерии обнаруживаются в желудочной слизи, располагаются свободно. Helicobacter pylori имеет характерные для него изогнутые формы: спиралевидную, в виде буквы «S» или распахнутых крыльев птицы.

Оценка результатов биопсии

Вид исследования Норма Патология
Бактериологический посев биоптата на Helicobacter pylori Отрицательный

(рост бактерий не обнаружен)

Положительный

(на питательной среде выросли культуры Helicobacter pylori)

Гистологическое исследование биоптата на Helicobacter pylori (качественный анализ) Отрицательный

(бактерии в мазке отсутствуют)

Положительный (обнаружена одна или большее количество бактерий при микроскопии)
Гистологическое исследование биоптата на Helicobacter pylori (количественный анализ) Отрицательный (0 бактерий в мазке, инфицирования нет) 3 степени распространения возбудителя (микроскопия на увеличении в 360 раз):

  • Слабая обсемененность Helicobacter pylori (+) – в поле зрения не более 20 бактерий
  • Умеренная обсемененность Helicobacter pylori (++) – в поле зрения от 20 до 50 микроорганизмов
  • Высокая обсемененность Helicobacter pylori (+++) – в поле зрения более 50 микробных тел

Резюме

Таким образом, существует 2 точных диагностических метода выявления хеликобактериоза. Они являются «золотым стандартом» в современной гастроэнтерологии. Первый метод – неинвазивный: дыхательный уреазный тест с раствором мочевины, меченой нерадиоактивным углеродом; второй – инвазивный: ФГДС с биопсией и последующим гистологическим изучением образцов тканей.

Для подтверждения инфицирования Helicobacter pylori требуется не менее 2 различных исследований. Диагноз ставят на основании клинической симптоматики и результатов, полученных в процессе лабораторных и эндоскопических мероприятий.

prokishechnik.info

Хеликобактер пилори и язвенная болезнь

Язвенная болезнь развивается у тех пациентов, у которых наблюдается дисбаланс между защитными факторами слизистой оболочки и агрессивными воздействиями. Кроме известной роли нерационального питания, курения и злоупотребления спиртными напитками, в факторы агрессии входит хеликобактерная инфекция, вызываемая бактерией Helicobacter pylori. Этот микроорганизм способен продуцировать ряд веществ, нарушающих работу защитных факторов и обуславливающих повреждение слизистой оболочки желудка или двенадцатиперстной кишечника.

Подобная инфекция длительное время существует в желудочно-кишечном тракте человека, и не всегда проявляется симптомами заболевания. Однако на фоне дополнительного воздействия повреждающих факторов может развиться язвенная болезнь.

Заражается человек алиментарным путем, т.е. в связи с употреблением пищи, использования плохо вымытой посуду и т.д. Количество носителей данной бактерии в человеческой популяции – более 50%.

Для лечения хеликобактерной инфекции используется специальная терапия, включающая в себя: два антибактериальных препарата (Амоксициллин и др.), ингибитор протонной помпы (Омепразол, Рабепразол) и обволакивающее средство (Маалокс и пр.).

Определение хеликобактерной инфекции

В арсенале лечащего врача существует несколько диагностических методов, с помощью которых определяют Helicobacter pylori. Сюда относят:

  1. Серологический анализ крови пациента с поиском в ней антител против данных бактерий. При определении антител и их количества можно судить об активности инфекции или ее давности.
  2. ПЦР-исследование кала больного, с помощью которого выявляют генетический материал бактерии.
  3. Определение уреазной активности с помощью дыхательного теста.
  4. Обнаружение хеликобактерной инфекции в биопсийном материале после проведения эзофагогастродуоденоскопии (ЭГДС). При этом возможно провести уреазный тест.

Важно отметить, что в соответствии с клиническими стандартами диагностики язвенной болезни для постановки диагноза должно использоваться минимум два различных вида обследования. При этом в каждом конкретном случае, выбор методов диагностики осуществляет лечащий врач.

Проведение гастроскопии с тестом на хеликобактер является одним из наиболее точных способов постановки диагноза. Подобное исследование назначают больным с характерными для язвенной болезни симптомами (голодные боли в верхней части живота, тошнота, снижение интенсивности болевого синдрома после приема пищи и пр.). Также данный анализ может использоваться для контроля эффективности терапии.

Уреазный тест при гастроскопии

Особенность бактерии, которую можно использовать при исследовании на хеликобактер, – выделение уреазы, способной расщеплять мочевину. В результате данной реакции образуется углекислый газ, который жизненно необходим самой бактерии для защиты от кислого содержимого желудка. Данную уреазную активность можно выявить при гастроскопии.

Изучение уреазной активности представляет большую диагностическую ценность, так как только хеликобактер способна продуцировать данный фермент.

Использование фиброгастродуоденоскопии (ФГС) позволяет врачу зрительно оценить состояние слизистой оболочки органов пищеварительной системы. Для этого применяется небольшой гибкий фиброскоп с видеокамерой и источником освещения на конце. При визуальном осмотре внутреннего слоя желудка и двенадцатиперстной кишки опытный врач может заметить измененные участки, характерные для язвенной болезни. Проведение биопсии, т.е. взятия небольшого кусочка подозрительной слизистой оболочки, может быть использовано для дальнейшей диагностики.

После того как кусочек слизистой взят, его помещают в специальную химическую среду, способную определять активность уреазы в бактериях. Если слизистая была с хеликобактер, то среда изменит свой цвет на малиновый в связи с изменением pH-раствора в щелочную сторону. Если же цвет не изменился, то наличие подобной бактерии маловероятно, но исключать это полностью нельзя.

Биопсия и цитология

Наиболее точный тест на хеликобактер при ФГДС – проведение биопсии с последующим цитологическим исследованием образца. При подобном анализе вероятность получения ложных результатов минимальна, так как используется непосредственное определение бактерий в ткани желудка.

Для получения материала слизистой оболочки могут применяться два метода: мазки-отпечатки, содержащие на себе клетки и бактерии, а также полноценная биопсия, связанная с забором небольшого кусочка внутреннего слоя органа. Как правило, биопсию стараются проводить на наиболее подозрительных участках слизистой, но ни в коем случае не на месте язв или эрозивных дефектов, так как хеликобактер там не обитает.

Комплексное применение методов диагностики позволяет выявить причину возникновения язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки у пациента, и назначить наиболее подходящее лечение.

После этого, используются специальные окраски, позволяющие выделить Helicobacter pylori и увидеть микроорганизм непосредственно под микроскопом. Данный метод наиболее эффективен, однако, в связи с инвазивностью применяется не так часто.

Гастрокопия с тестом на хеликобактер – совокупность нескольких диагностических процедур, позволяющих выявить хеликобактерную инфекцию. Последнее необходимо в качестве показания к началу эррадикационной терапии, направленной на избавление от данного микроорганизма и лечение язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки. Правильное проведение подобных диагностических процедур позволяет избежать ложноположительных и ложноотрицательных результатов, что очень важно для больного.

diagnostinfo.ru

Немного о Helicobacter pylori

Экспресс тест на хеликобактер пилори
Бактерия Хеликобактер пилори — причина большинства случаев язвы желудка и ДПК, а также хронического гастрита с пониженной кислотностью.

Бактерия хеликобактер пилори относится к грамотрицательным спиралевидным микроорганизмам и обычно «поселяется» в антральной части желудка или кишечнике. Продукты ее жизнедеятельности способны вызывать развитие эрозивных или воспалительных процессов на слизистой оболочке желудка или двенадцатиперстной кишки и провоцируют такие заболевания, как язвенная болезнь, гастрит, гастродуоденит и рак.

В 2005 году ученые Робин Уоррен и Барри Маршал получили Нобелевскую премию за открытие истинных механизмов развития этих недугов, хотя ранее предполагалось, что они вызываются другими причинами (стресс, неправильное питание и пр.).

Бактерия передается от человека к человеку различными путями: при поцелуе и через бытовые предметы (общую посуду, средства личной гигиены и пр.). Как правило, впервые хеликобактер поступает в организм еще в детском возрасте. Попадая в пищеварительный тракт, она может выживать даже в кислой среде, которая создается желудочным соком.

Развитие заболевания может происходить сразу же после заражения хеликобактер или спустя какое-то время. Иногда инфекция благополучно сохраняется в организме годами, и запуск ее активирования происходит под воздействием определенных благоприятных для ее прогрессирования факторов. Обычно появление первых симптомов инфицирования наблюдается на фоне сбоев в работе иммунной системы, которые возникают из-за сильных стрессовых ситуаций или во время инфекционных заболеваний.

Кроме этого, внедрение хеликобактер в слизистые оболочки может провоцироваться их повреждениями. Этому способствует прием грубой или горячей пищи, неправильное питание, поражения стенок желудка или двенадцатиперстной кишки компонентами желудочного сока или выпитыми агрессивными жидкостями (кислотами, щелочами).

Первые симптомы инфицирования хеликобактер таковы:

  • частые отрыжки;
  • кислая изжога;
  • икота;
  • неприятный запах изо рта.

Несколько позднее у больного появляются:

  • ощущения дискомфорта и боли в области желудка;
  • тошнота и позывы на рвоту после еды;
  • нарушения стула;
  • признаки нарушения обмена веществ (выпадение волос, ломкость ногтей, сухость кожи).

Кроме этого, у некоторых больных могут возникать новые аллергические реакции, быстрое насыщение принятой пищей или плохая усвояемость мясных продуктов.

Появление любых из вышеописанных симптомов может становиться поводом для назначения дыхательных тестов на хеликобактер. После проведения всесторонней диагностики врач сможет назначить правильное лечение, которое способно предотвратить развитие тяжелых осложнений заражения этой бактерией.

Самыми опасными проявлениями инфицирования хеликобактер могут становиться желудочные или кишечные кровотечения. Такой симптом провоцируется образованием кровоточащих язв или эрозий на слизистых оболочках. Впоследствии он приводит к развитию анемии и более тяжелых осложнений (перфорация язвы, перитонит, малигнизация эрозий или язв и пр.).


Суть методик

Ранее для выявления хеликобактер применялись три методики:

  1. Тест образца желудочной слизи при ФГДС.
  2. Анализ крови на выявление антител к этой бактерии.
  3. ПЦР анализ кала.

Первый метод и сейчас является наиболее эффективным и достоверным. Однако для его проведения требуется выполнение ФГДС, которая является достаточно неприятной и инвазивной процедурой для пациента. Второй метод также инвазивен, так как требует забора крови. Он является наименее информативным и может выполняться только в отдельных случаях по рекомендации врача. ПЦР анализ кала является достоверным в 93-95 % случаев и неинвазивным, но после перенесенного заболевания выведение хеликобактер из организма будет продолжаться, и его результаты будут еще длительное время оставаться положительными из-за отхождения ДНК уже «убитых» антибиотиками бактерий.

Не так давно появились новые неинвазивные методики для выявления хеликобактер – С-уреазный дыхательный тест и дыхательный Хелик-тест (или быстрый тест).

С-уреазный дыхательный тест

Суть этого метода диагностики хеликобактер основана на способности этой бактерии вырабатывать особый фермент (уреазу), который ускоряет гидролиз мочевины. Этот процесс сопровождается выделением паров углекислого газа и аммония. В норме такой продуцируемый бактерией фермент не присутствует в желудке.

Для выявления уреазы в желудочном соке обследуемому необходимо принять реактив в виде капсулы с 75 мг мочевины, помеченной радиоактивным или нерадиоактивным углеродом (С14 или С13). Если у человека в желудке присутствует хеликобактер, то после приема препарата он будет выдыхать пары углекислого газа и аммиака. Наличие этих веществ зафиксирует прибор (газоанализатор), и тест будет считаться положительным. У здорового человека в выдыхаемом воздухе такие пары не обнаруживаются, и тест является отрицательным.

С-уреазный дыхательный тест для выявления хеликобактер достоверен в 95-100 % случаев, это позволяет применять данную методику для обследования многих пациентов. Его результаты бывают недостоверными только при неправильной подготовке к анализу. Исследование длится не более 30-40 минут, а результаты получаются уже спустя 1-2 дня после обследования.

С-уреазный тест с С14 абсолютно безопасен для здоровья пациента и практически не имеет противопоказаний. Он может выполняться всем категориям больным, но детям, беременным и кормящим женщинам обычно рекомендуется выполнение его более щадящего аналога – С-уреазного теста с мочевиной, помеченной нерадиоактивным С13.

Дыхательный Хелик-тест

Суть этого метода выявления хеликобактер так же основана на способности бактерии выделять уреазу, но для анализа в качестве реактива применяется раствор с 0,5 г карбамида. Уреазная активность бактерии проявится гидролизом этого вещества, а результаты очень быстро считываются при помощи анализа выдыхаемого воздуха индикаторной трубкой (за 15 минут) или цифровым аппаратом (за 9 минут). При этом измерительная аппаратура фиксирует в выдыхаемом пациентом воздухе не пары меченого углеводорода (как при С-уреазном тесте), а количественное содержание паров аммиака.

  • При использовании индикаторной трубки итоги обследования оцениваются по цвету индикаторной композиции и фиксируются на бланке анализа вручную.
  • При применении цифрового аппарата данные сохраняются автоматически в базе прибора и на компьютере.

Для проведения Хелик-теста требуется минимальная подготовка пациента, и он, как и С-уреазный тест, не имеет никаких противопоказаний. Такая методика выявления хеликобактер обладает высокой долей достоверности и позволяет за считанные минуты выявить заражение бактерией в принципе. Этот базовый тест стоит дешевле, но он менее информативен, чем С-уреазный. Подобный анализ нередко применяется гастроэнтерологами, терапевтами, педиатрами и семейными врачами для подтверждения инфицирования хеликобактер. Достоверность Хелик-теста составляет около 75 %.

Показания к назначению дыхательных тестов на хеликобактер

Экспресс тест на хеликобактер пилори
Неприятный запах изо рта в комплексе с другими признаками возможной патологии пищеварительного тракта — показание к проведению дыхательного теста.

Врач может назначить проведение дыхательного теста на хеликобактер при следующих состояниях или заболеваниях:

  • возникновение во время или после приема пищи тяжести или болевых ощущений в желудке ноющего, колющего, давящего или схваткообразного характера;
  • частые отрыжки;
  • ухудшение аппетита;
  • неприятный запах изо рта или белый налет на языке;
  • появление тошноты или рвоты после еды;
  • у одного из членов семьи во время анализов была выявлена Helicobacter pylori;
  • Helicobacter pylori была выявлена ранее и у больного присутствуют признаки хеликобактериоза;
  • гастрит, гастродуоденит, язвенная болезнь или другие выявленные ранее заболевания пищеварительной системы;
  • противопоказания к выполнению ФГДС;
  • необходимость оценки эффективности проведенной терапии.

Как подготовиться к исследованию

При подготовке к дыхательным тестам на хеликобактер пациент должен соблюдать следующие правила:

  1. Тест должен назначаться только спустя 3-4 (иногда 4-6) недели после приема антибиотиков или антисекреторных средств. Прием анальгетиков, противовоспалительных или антацидных препаратов должен прекращаться за 5 дней до проведения исследования. О применении других лекарственных средств следует обязательно сообщить врачу для возможной коррекции приема препаратов.
  2. За 3 дня до теста рекомендуется отказаться от приема алкоголя.
  3. За день до анализа исключить из рациона вызывающие метеоризм продукты: черный хлеб, картофель, бобовые, капусту и пр.
  4. Ужин перед тестом должен быть легким и не слишком поздним. Последний прием пищи должен состояться не менее чем за 6-8 часов до анализа.
  5. Утром в день исследования нельзя принимать пищу и жевать жевательную резинку. Отказаться от курения следует за 3-4 часа до процедуры.
  6. Перед тестом необходимо почистить зубы и тщательно прополоскать рот. После этого нельзя пользоваться ополаскивателями для полости рта и т. п.
  7. За час до исследования допускается прием до 100 мл воды.

Как проводится исследование

С-уреазный дыхательный тест

Такой тест может проводиться в условиях лаборатории поликлиники или стационара.

Для сдачи С-уреазного теста пациенту следует выполнить следующие действия:

  1. Больного усаживают на кушетку и дают подышать в специальную трубочку тест-системы. Дыхание должно быть обычным и не форсированным. Слюна не должна затекать в трубку, так как исследование придется начинать заново через 40-60 минут.
  2. После этого пациенту необходимо выпить капсулу, содержащую 75 мг мочевины, помеченной С14 или С13. Для этого препарат растворяют в 50 мл воды.
  3. Для лучшего распространения принятого реактива по поверхности желудка больному рекомендуется прилечь на кушетку и повернуться сначала на один бок, а затем на другой.
  4. Через 10 минут пациенту следует вновь сесть и подуть в пластиковую трубочку. При использовании помеченной С13 мочевины будет достаточно проведения еще одного забора выдыхаемого воздуха, а при применении карбамида с С14 такие же действия выполняются еще 2 раза через каждые 10 минут.
  5. Полученные в процессе теста образцы выдыхаемого воздуха запечатываются в специальные пакеты или пробирки, маркируются и отправляются в лабораторию для дальнейшего анализа газового состава.


Хелик-тест

Такой тест может проводиться в условиях кабинета врача или непосредственно у постели больного.

Для сдачи Хелик-теста следует выполнить следующие действия:

  1. Пациент удобно располагается в положении сидя.
  2. Врач предлагает ему подышать в обычном режиме в пластиковую трубку на протяжении 6 минут. Дыхание не должно форсироваться, а используемая трубка не должна касаться языка и неба, так как при попадании в нее слюны результаты исследования могут искажаться. Тест-системы с индикаторной трубкой более подвержены к случайному затеканию слюны, чем системы с цифровыми аппаратами, снабженные специальными мундштуками. При попадании слюны в трубку исследование следует начать заново через 30-40 минут.
  3. Специалист фиксирует данные первого этапа обследования. При использовании цифрового аппарата эти результаты считываются и запоминаются автоматически.
  4. После этого врач дает пациенту принять 0,5 г карбамида, который предварительно растворяется в 50 мл воды.
  5. Далее больной вновь дышит в трубку, но с другой стороны. Этот этап анализа занимает около 6 минут.
  6. После завершения второй части обследования результаты вновь фиксируются.
  7. Обработка данных и составление заключения проводится специалистом, и результаты анализа не доставляются в лабораторию.


Результаты

Расшифровка результатов дыхательных тестов на хеликобактер проводится врачом.

С-уреазный тест на хеликобактериоз

При оценивании результатов С-уреазного теста на хеликобактериоз учитываются показатели первой пробы выдыхаемого воздуха и последующих. Для составления заключения учитывается разница между первой и второй пробой. Если она составляет менее 0,3 промилле, тот тест считается отрицательным (т. е. человек не инфицирован бактерией). При более высоких значениях этого коэффициента результат теста является положительным и указывает на присутствие хеликобактер в организме. Чем выше этот показатель, тем выше степень инфицированности:

  • легкая – 1-3,4;
  • средняя – 3,5-6,4;
  • тяжелая – 6,5-9,4;
  • крайне тяжелая – 9,5 и выше.

Результаты анализа могут получаться на 1-2 день после проведения теста. Максимальная длительность хранения забранных проб выдыхаемого воздуха в условиях лаборатории составляет не более 10 дней.

Хелик-тест

Результаты исследования, проводимого при помощи индикаторной трубки, оцениваются врачом визуально по специальной шкале. При применении тест-систем с цифровыми аппаратами итоги анализа фиксируются автоматически.

Результаты Хелик-теста могут получаться мгновенно или через 30 минут после исследования (в зависимости от используемой тест-системы). Они не показывают количественных результатов и указывают только на присутствие или отсутствие инфицирования пациента хеликобактер.

Что может повлиять на достоверность результатов

Изменить достоверность дыхательных тестов на хеликобактер могут следующие факторы:

  • затекание слюны в трубку;
  • неправильная подготовка к исследованию (прием лекарств, пищи, алкоголя, курение и пр.).

К какому врачу обратиться

Назначить проведение дыхательных тестов на хеликобактер может семейный врач, терапевт, педиатр или гастроэнтеролог. При выявлении этой болезнетворной бактерии пациенту рекомендуется консультация гастроэнтеролога, который и определяет дальнейший план лечения хеликобактериоза. При необходимости больному могут назначаться дополнительные виды обследований: ФГДС, биохимическое исследование крови, рН-метрия, биопсия, анализ кала и др.

Дыхательные тесты на хеликобактер являются абсолютно безболезненными, неинвазивными и информативными методами выявления хеликобактериоза. Большей достоверностью обладают С-уреазные тесты, которые позволяют в 95-100 % случаев выявлять степень инфицирования этим болезнетворным организмом. Тест-система Хелик точна только в 75 % случаев и ее применение дает возможность определить лишь факт наличия хеликобактериоза.

Елена Малышева в программе «Здоровье» рассказывает о методах экспресс-диагностики H. pylori:

myfamilydoctor.ru